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熒光素酶報(bào)告基因

簡(jiǎn)要描述:熒光素酶報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)是一種常用的生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù),用于研究基因調(diào)控和蛋白質(zhì)相互作用以及藥物篩選等領(lǐng)域。

  • 更新時(shí)間:2024-10-22
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熒光素酶報(bào)告基因

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熒光素酶報(bào)告基因實(shí)驗(yàn)是一種常用的生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù),用于研究基因調(diào)控和蛋白質(zhì)相互作用以及藥物篩選等領(lǐng)域。實(shí)驗(yàn)的基本步驟包括選擇熒光素酶報(bào)道基因、將報(bào)告基因克隆到質(zhì)粒中、將質(zhì)粒導(dǎo)入到細(xì)胞中、加入底物熒光素并檢測(cè)熒光值高低來(lái)判斷不同處理組對(duì)該轉(zhuǎn)錄調(diào)控原件的影響。熒光素酶報(bào)告實(shí)驗(yàn)原理被廣泛應(yīng)用于基因表達(dá)調(diào)控、蛋白質(zhì)相互作用、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)等領(lǐng)域。熒光素酶報(bào)告實(shí)驗(yàn)可以驗(yàn)證microRNA同mRNA靶向互作。

轉(zhuǎn)錄因子的 DNA 結(jié)合域和順式作用元件實(shí)現(xiàn)共價(jià)結(jié)合,從而對(duì)基因的表達(dá)起抑制或增強(qiáng)的調(diào)控作用。

熒光素酶(Luciferase):是能夠催化底物氧化發(fā)光的一類(lèi)酶的統(tǒng)稱(chēng)

熒光素酶的種類(lèi)很多,其中應(yīng)用較為廣泛的是螢火蟲(chóng)熒光素酶(Firefly luciferase,F(xiàn)LUC)和海腎熒光素酶(Renilla luciferase,RLUC)

實(shí)驗(yàn)原理

將靶啟動(dòng)子片段插入熒光素酶表達(dá)序列前方的報(bào)告基因質(zhì)粒,然后共轉(zhuǎn)染細(xì)胞

 

熒光素酶報(bào)告基因實(shí)驗(yàn)結(jié)果

熒光素酶報(bào)告基因熒光素酶報(bào)告基因 

 


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